您好!欢迎访问昆山伯利克精密仪器有限公司网站!
全国服务咨询热线:

13636648666

当前位置:首页 > 技术文章 > DNA基因合成仪反应步骤

DNA基因合成仪反应步骤

发布时间:2021-12-18      点击次数:959
  基因合成是用人工方法合成基因的技术,是基因获取的手段之一,相对于从已有生物中获取基因来说,基因合成无需模板,因而不受基因来源限制。基因合成有两种途径,一是向基因合成公司订制,二是作本地基因合成。由于基因合成技术还没有一个统一的方法,基因合成的技能和经验在合成过程中具有决定性的影响,所以大部分基因合成都是在专业人员手中完成的,这也决定了途径一是主要渠道。

  DNA基因合成仪合成技术原理:
  采用固相亚磷酰胺三酯法合成DNA的片段,它具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体.上完成DNA链的合成的,合成的方向是由待合成引物的3'端向5'端合成的,相邻的核苷酸通过3'→5'磷酸二酯键连接。

  DNA基因合成仪反应步骤:
  1.将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的核苷酸与三氯*酸反应,脱去其5'-羟基的保护基团DMT ,获得游离的5'-羟基。
  2.亚磷酰胺保护的核苷酸单体, 与活化剂四氮唑混合.得到核苷亚磷酸活化中间体. 它的3'端被活化,与CPG载体上连接碱基的5'-羟基发生缩合反应。
  3.带帽(capping)反应。缩合反应中会有少量5"-羟基没有参加反应.用乙酸酐和1-甲基咪唑封闭5"-羟基,使其不能再继续发生反应,这种短片段在纯化时可以分离去除。
  4.在氧化剂碘的作用下,亚磷酰形式转变为更稳定的磷酸三酯。


DNA基因合成仪

 

昆山伯利克精密仪器有限公司
地址:昆山市玉杨路1038号
邮箱:jason.xu@biolytic.cn
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息