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768道基因合成仪反应步骤

发布时间:2022-01-05      点击次数:385
  768道基因合成仪仪器硬件易于操作,只需将反应板放在仪器中,便可开始合成。维护简单快捷。更换管子或阀门很容易。所使用耗材具有广泛的兼容性,既能使用预装填合成柱,也可以使通用合成柱。智能清污排水系统在用真空系统排空柱之前、期间和之后;标准氩气或氮气吹扫柱上部隔绝空气和水气,并且气体的使用量非常低。提供给试剂瓶的惰性气体由仪器中的两个不同调节器调节。一个调节单体和活化剂瓶的压力,另一个调节其他瓶子的压力。每个调节器都有一个压力计来指示该试剂的压力。

  768道基因合成仪合成技术原理:
  采用固相亚磷酰胺三酯法合成DNA的片段,它具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体.上完成DNA链的合成的,合成的方向是由待合成引物的3'端向5'端合成的,相邻的核苷酸通过3'→5'磷酸二酯键连接。

  768道基因合成仪反应步骤:
  1.将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的核苷酸与三氯*酸反应,脱去其5'-羟基的保护基团DMT ,获得游离的5'-羟基。
  2.亚磷酰胺保护的核苷酸单体, 与活化剂四氮唑混合.得到核苷亚磷酸活化中间体. 它的3'端被活化,与CPG载体上连接碱基的5'-羟基发生缩合反应。
  3.带帽(capping)反应。缩合反应中会有少量5"-羟基没有参加反应.用乙酸酐和1-甲基咪唑封闭5"-羟基,使其不能再继续发生反应,这种短片段在纯化时可以分离去除。
  4.在氧化剂碘的作用下,亚磷酰形式转变为更稳定的磷酸三酯。


768道基因合成仪

 

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