说一说48道基因合成仪使用的步骤
更新时间:2022-06-08 点击次数:1639
48道基因合成仪的优点是什么?
1.合成周期短,可以保证序列正确无误。
2.基因合成具有更大的灵活性,可以对基因的酶切位点和基因序列进行修改,方便下游的克隆和实验。
3.研究人员根据自己的意愿设计得到自然界中很难获得甚至不存在的基因。
4.基因合成的基因可以进行密码子优化,使基因在各种生物表达体系中都能得到良好表达。
48道基因合成仪使用的步骤如下:
1)仔细检查合成仪上所有试剂瓶中的试剂量,必要时换掉试剂瓶,特别注意乙腈的量,因为该溶剂用量较大。
2)将标记好的清洁的收集瓶装在合成仪上。
3)将要合成的DNA序列输入合成仪。
4)检查选择的合成步骤是否正确。
5)选择结束方法:TritylOffAuto是仪器的原始状态,若打算以5,—DMT基团连接纯化寡核苷酸,将其转变为TritylOnAuto结束状态。
6)选择结束方法,一般为系统的原始状态。
7)在每个柱监视器的Username下,输入你所希望的保存名字。
8)以代码代替相应的DNA序列标记每一个收集瓶。
9)打印出每一个柱设置的详细资料。
10)检查打印出来的资料是否正确。
11)运行StartColumn步骤检查每一个柱的位置,确保合成仪上合成柱处于正确的位置。
12)检查连接在合成仪上的溶剂残留(废液瓶)是否充满。
13)如果分部收集器用来收集每个DMT脱保护步骤的流出物,确保试管充分清洁干净,并打开分部收集器,确保DMT废液管路通向分部收集器。
14)启动循环,运行开始程序清洗试剂管路,除去原来的试剂。