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了解DNA合成仪的一般操作步骤

更新时间:2023-10-19      点击次数:451
DNA合成仪用于固相合成法,每次将一个核苷酸加到所接长的寡核苷酸链上,加入每一个核苷酸都利用相同的化学反应与相应的嘌呤或嘧啶碱基衍生物作用。被广泛应用在生物技术、生命科学实验、基因治疗、生物医药等领域。随着基因治疗以及生物医药行业快速发展,预计未来一段时间我国DNA合成仪市场需求将继续保持快速增长态势。

DNA合成仪的使用步骤:
以亚磷酰胺寡核苷酸合成为例介绍该类仪器的一般操作步骤:
1)仔细检查合成仪上所有试剂瓶中的试剂量,必要时换掉试剂瓶,特别注意乙腈的量,因为该溶剂用量较大。
2)将标记好的清洁的收集瓶装在合成仪上。
3)将要合成的DNA序列输入合成仪。
4)检查选择的合成步骤是否正确。
5)选择结束方法:TritylOffAuto是仪器的原始状态,若打算以5,—DMT基团连接纯化寡核苷酸,将其转变为TritylOnAuto结束状态。
6)选择结束方法,一般为系统的原始状态。
7)在每个柱监视器的Username下,输入你所希望的保存名字。
8)以代码代替相应的DNA序列标记每一个收集瓶。
9)打印出每一个柱设置的详细资料。
10)检查打印出来的资料是否正确。
11)运行StartColumn步骤检查每一个柱的位置,确保合成仪上合成柱处于正确的位置。
12)检查连接在合成仪上的溶剂残留(废液瓶)是否充满。
13)如果分部收集器用来收集每个DMT脱保护步骤的流出物,确保试管充分清洁干净,并打开分部收集器,确保DMT废液管路通向分部收集器。
14)启动循环,运行开始程序清洗试剂管路,除去原来的试剂。

 

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