一、日常操作规范
试剂准备与检查
确保试剂瓶（如乙腈、活化剂、氧化剂）密封良好，保持氩气压力稳定，防止外界空气进入影响合成效果。
合成前检查试剂余量，及时更换空瓶，避免因试剂不足导致合成中断。
序列输入与参数设置
通过计算机辅助设计软件输入目标DNA序列，考虑密码子偏好性、二级结构及限制酶位点。
确认合成步骤（如脱保护、耦合、封闭、氧化）是否正确，选择结束方法（如TritylOnAuto保留5'-DMT基团以便后续纯化）。
合成过程监控
启动前运行StartColumn步骤，检查合成柱位置是否正确。
合成中通过电导流动池监测DMT阳离子释放量，判断反应进度。
定期检查温度、压力等参数是否在正常范围内。
产物处理
合成完成后，从固相载体上切割产物，采用OPC、PAGE或HPLC纯化去除短片段和盐离子。
纯化后产物分装保存，避免反复冻融。
二、日常维护要点
瓶塞“O”形环
每月检查一次，每年至少更换一次。若出现白色沉淀，用乙腈棉签清洗。
更换时用止血钳夹取旧环，确保插塞无颗粒后安装新环，并进行压力测试。
储液瓶与管路
保持储液瓶清洁，定期检查氩气压力及管路气密性。
合成前用新试剂清洗管路，防止旧试剂残留干扰反应。
流路节流阀
每月清洗一次，先在水中煮沸15分钟，再用甲醇超声波清洗，防止阻塞。
仪器清洁与防尘
每周用湿布擦拭外壳，避开通风口；高灵敏度实验后，用紫外灯照射反应仓15分钟灭菌。
长期不用时，每周开机1-2次，每次约半小时，防止部件受潮。
三、常见故障排查
合成产率低
原因：试剂失效、管路泄漏、合成柱位置偏差。
解决：更换试剂，检查管路气密性，重新校准合成柱位置。
产物纯度不足
原因：纯化方法不当、合成步骤错误。
解决：优化纯化条件（如增加HPLC纯化步骤），检查合成参数是否正确。
仪器报警或中断
原因：废液瓶过满、电源波动、温度异常。
解决：清空废液瓶，使用稳压电源，检查温度传感器是否故障。
数据异常（如电导值波动）
原因：电导池污染、试剂混入杂质。
解决：清洗电导池，更换新试剂并重新校准。
四、操作注意事项
无菌环境：引物合成对污染敏感，操作时需佩戴手套，避免外源DNA或酶污染。
试剂保存：乙腈等溶剂需避光保存，活化剂和氧化剂需密封防止受潮。
数据记录：详细记录每批次合成的序列、试剂批号、质检图谱，便于追溯问题。
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