引物合成仪常见故障诊断与解决方案：堵塞、泄漏与数据异常分析

　　引物合成仪是分子生物学实验室的核心设备，其高效稳定运行对实验至关重要。最常见的三类故障是管路堵塞、阀门泄漏和合成数据异常。本文将对此进行简要分析并提供针对性解决方案。

　　一、管路堵塞

　　这是普遍的故障，直接导致合成失败。

　　诊断：通常伴随柱压异常升高、试剂输送不畅、最终产量极低或无产物。

　　主要原因与解决方案：

　　合成柱堵塞：最常发生。因单体或碱基溶液沉淀、柱床干涸或固体颗粒引起。解决方案：立即中断合成，用强效去阻塞溶剂（如乙腈、浓缩TCA/二氯甲烷溶液）反向或正向冲洗合成柱及上游管路。日常需确保试剂新鲜、无水，合成后充分冲洗。

　　管路或阀门微堵：特定试剂管路压力高。由结晶或降解物引起。解决方案：执行针对特定试剂的“Purge”清洗程序，或手动拆卸清洗相关阀块和毛细管路。

　　二、阀门与管路泄漏

　　泄漏导致试剂计量不准、交叉污染，甚至损坏设备。

　　诊断：压力无法建立或持续下降、反应柱周围有液体积聚、合成产率低且序列中出现“缺失”或错误掺入。

　　主要原因与解决方案：

　　密封圈老化或磨损：阀门（尤其是主分配阀）的转子密封垫或管路接头密封圈是最常见泄漏点。解决方案：根据维护计划定期预防性更换所有关键密封圈。发现泄漏后，立即停机，参照手册更换对应密封部件。

　　管路连接松动或破裂：检查各卡套接头是否紧固，查看特氟龙毛细管有无折痕或裂缝。解决方案：重新紧固或更换损坏的管路。

　　三、合成数据异常

　　表现为产率低、纯度差（特别是长链引物失败），但仪器无报警。

　　诊断：HPLC/质谱分析显示产物不正确、截短序列多或全长产率远低于预期。

　　主要原因与解决方案：

　　试剂问题（最常见）：单体溶液降解（特别是G单体）、活化剂或氧化剂失效、乙腈含水量超标。解决方案：严格管理试剂，使用新鲜、高纯度、无水的试剂和乙腈，定期更换干燥剂。

　　脱帽/脱保护效率低：脱帽液或最终切割/脱保护试剂（如浓氨水）浓度不足或时间设置错误。解决方案：确保试剂配制准确，并验证脱保护反应程序是否充分。

　　软件或参数错误：虽然罕见，但错误的合成序列或循环参数会导致系统性失败。解决方案：每次合成前仔细核对序列文件和合成参数设置。

　　总结：预防胜于治疗。建立定期预防性维护计划（如每月清洗、每季度更换密封圈、监控试剂有效期）并保持详细的工作日志，是最大限度减少故障、保障引物合成成功率与质量的有效策略。当遇到复杂问题时，应及时联系设备工程师。