DNA/RNA合成仪的工作原理介绍

　　DNA/RNA合成仪是自动化合成脱氧核糖核酸、核糖核酸序列的专用分子生物学仪器，依托固相亚磷酰胺法，可准确高效合成指定序列的核酸片段，是分子生物学、基因研究领域的核心设备。

　　DNA/RNA合成仪的核心原理是固相亚磷酰胺三酯法，通过反复循环的化学反应逐步延长寡核苷酸链。

　　合成循环：

　　脱保护：用TCA去除固相载体上核苷酸5'-端的DMT保护基，暴露羟基

　　偶联：在活化剂作用下，下一个亚磷酰胺单体与暴露的羟基发生偶联反应，形成亚磷酸三酯键

　　封端：用乙酸酐和吡啶封闭未反应的羟基，防止后续产生缺碱基的短链杂质

　　氧化：用碘液将不稳定的亚磷酸三酯氧化为稳定的磷酸三酯键

　　上述四步为一个整循环，每循环约2.5~6分钟，重复20~200次即可合成目标长度的寡核苷酸，合成完成后进行氨解脱保护。

　　使用注意事项：

　　禁止含水溶剂进入系统；乙腈必须经过分子筛深度除水；

　　环境湿度>45% 严禁开机，极易造成单体水解报废；

　　禁止硬质铁丝疏通管路/阀体，划伤设备内壁导致不可逆吸附；

　　RNA合成周期更长，必须更频繁更换密封件，严防水汽渗入。