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基因合成技术酶学合成及化学合成法详解

发布时间:2022-04-19      点击次数:159
   基因合成是体外合成双链DNA的一种方法,是获得目标基因的手段之一。人工合成基因出现于20世纪60年代,通过基因合成可以获得自然界中不存在的基因。
  基因合成是根据一种蛋白质的基因序列,设计合成相互重叠的单链寡核苷酸,再通过PCR方法连接全长。基因合成不需要模板,是获取基因的手段之一,通过提高异源宿主的表达量进行全基因合成。目前,该技术主要应用于基因异源表达,在对基因密码子进行优化后。
 
  基因合成技术可以分为两类:
  1、酶学合成:以RNA为模板,逆转录合成cDNA。这是获取真核结构基因最主要、常用的方法。由于RNA单一成分难以分离,合成cDNA分子往往混杂,需要基因分离法分离;用这种方法很难得到全长互补的DNA分子,所以要进一步剪切、拼接。
  2、化学合成法:化学法或化学法与酶学法相结合合成目的基因。
 
  另外,基因合成技术还用于合成难以获取模板的基因和自然界中不存在的新基因等。基因合成技术可以按照人们的意愿设计和灵活合成,正好符合现代生物学发展的潮流,将在越来越多的领域得到应用和发挥巨大的作用。
 
  基因合成的优点
  1、合成周期短,可保证序列100%准确;
  2、基因合成更灵活,可修改基因酶切位点和基因序列,便于下游克隆和实验;
  3、研究者按照自己的意愿设计获得自然界中难以获得或不存在的基因;
  4、基因合成基因可进行密码子优化,使基因在各种生物表达系统中得到良好表达。

基因合成仪

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