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氨解仪单管氨解与96孔板氨解方法

发布时间:2022-02-11      点击次数:169
   氨解仪的研制是为有效制备生物样品,用于PCR引物、探针和组分生产,DNA测序、DNA和RNA合成、随机启动、载体设计、DNA指纹和人工基因合成。是DNA/RNA/寡核苷酸脱保护基快捷高效稳定的解决方案。
  氨解仪单管氨解与96孔板氨解方法
  一、单管氨解
  1、将合成好的柱子用注射器针头将CPG或树脂粉末全部倒入氨解瓶中,并将对应的标签贴在氨解瓶上。
  2、加入冰三乙胺100ul,冰氨水1.5ml,盖紧瓶盖,放入80度烘箱氨解2小时。对用快速氨解单体合成的序列直接加氨水后55度2小时即可。在生产操作表上准确记录开始氨解的时间。
  注意事项:
  (1)在将引物放入氨解瓶时,要核对清楚标签,要一一对应。
  (3)三乙胺与氨水顺序要防止加反。(加反后会出现分层现象)
  (4)氨解中使用的氨水必须是冰冻状态中的氨水。
 
  二、96孔板氨解
  1、55度氨解
  对好标签,向合成板内加入适量的乙氰放在垫板上,重量平衡,高速离心。(对于3900,离心完后需用注射器针头将砂芯勾出)离心完后,将垫板换成正面贴有对应轮次标签的氨解板上。放入通风橱。先向合成板每孔加入50ul三乙胺,再向每孔加入250ul氨水,用胶带封好放入氨解盒中,在操作单上登记好时间和氨解人,放入55度烘箱氨解40min。
  2、80度氨解
  40min后取出,放入通风橱赶氨1分钟,高速离心。拿去合成板用20ul小枪取小样20ul;在向氨解板每孔内加入冰氨水200ul,封好胶带,用夹板夹好,登记好时间,放入80度烘箱氨解2h。
  注意事项:
  (1)务必在氨解板正面贴上该轮次标签,然后再位置一一对应垫再合成板下面,一起氨解,离心。
  (2)三乙胺与氨水顺序要防止加反。(加反后会出现分层现象)
  (3)氨解中使用的氨水必须是冰冻状态中的氨水。
  (4)夹板密封时要注意拧紧,防止出现漏氨。

氨解仪

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