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DNA基因合成仪仪器合成后的处理步骤

发布时间:2022-06-21      点击次数:123
  DNA基因合成仪主要用于基因合成、构建克隆及基因组变体文库合成,按用途可以分为三类:
  工业型合成仪合成通量较大,主要用于大型生物实验室以及商业机构中;
  实验室型合成仪合成通量较小,主要用于生物实验室中;
  大规模合成型合成仪可进行规模化量产,主要用于生物医药原料药制备领域。随着基因治疗以及生物医药行业快速发展,预计未来工业性以及大规模合成型DNA合成仪需求增速将加快。
  DNA基因合成仪合成产物的回收纯化方式:
  合成仪上合成的粗产物,使用浓氨水将寡核苷酸链从载体CPG上化学切割下来并脱去碱基环上的保护基团,再使用各种纯化方式去除合成过程中形成的短片段,得到合乎要求的DNA片段。合成后的处理步骤:
  1.切割:将合成好的寡核苷酸链从支持物上化学切割下来。
  2.脱保护基:须在此步前选好后续的纯化方法。一般用新鲜的浓氨水处理较长时间以脱掉腈乙基、苯甲酰基、异丙基,用三氟乙*脱5’-DMT.
  3.纯化:根据所合成寡核苷酸的组成和应用来选定纯化的方法。
  4.定量:根据寡核苷酸在260nm处的紫外吸收来定量。
  5.储存:需要注意的是避免紫外线等剧烈的物理环境,避免反复冻融,-20℃可稳定保存一年以上。
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